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探討elisa試劑盒的免疫沉淀技術(shù)

更新時(shí)間:2022-07-22點(diǎn)擊次數(shù):663
   elisa試劑盒具有特異性強(qiáng),準(zhǔn)確度高,檢查速度快等多方面的特點(diǎn)。在食品藥品監(jiān)督管理局,進(jìn)行食品檢查的時(shí)候,可是有效的快速的檢測(cè)出結(jié)果,看檢測(cè)食品是否符合要求。elisa試劑盒的檢測(cè)速度比國(guó)標(biāo)法快速,且敏感性高、特異性強(qiáng),結(jié)果分析簡(jiǎn)單。
  elisa試劑盒能便于滲透入組織細(xì)胞內(nèi),且未發(fā)現(xiàn)嚴(yán)重的物理吸附現(xiàn)象。在PPA實(shí)驗(yàn)中稀釋液常用含0.5%(v/v)Tween20的0.02mol/L Ph 7.4 Tris-HC1緩沖液。用特殊的微孔板作為測(cè)定板,elisa試劑盒用親和素包被微孔板,然后用生物維生素標(biāo)記探針的3端,再通過(guò)該生物維生素和包被在微孔板上的親和素發(fā)生連接,將探針固定在微孔板上,形成一個(gè)固相捕獲系統(tǒng)。
  擴(kuò)增時(shí)引物用抗原標(biāo)記,這樣擴(kuò)增產(chǎn)物中就會(huì)滲入抗原。
  PCR擴(kuò)增產(chǎn)物與微孔板上的探針雜交,從而捕獲被測(cè)靶序列,由于擴(kuò)增產(chǎn)物中已經(jīng)滲入抗原,在微孔中加入HRP標(biāo)記抗體后,酶標(biāo)抗體就與靶序列的抗原免疫結(jié)合,后加入酶底物進(jìn)行酶促顯色,elisa試劑盒通過(guò)光密度測(cè)定實(shí)現(xiàn)定量。
  PCR-ELISA比PCR本身在病毒分型,基因多態(tài)性分析與克隆鑒定等方面有其*的優(yōu)勢(shì)。另外,不應(yīng)用同位素標(biāo)記,因而避免了放射性帶來(lái)的危害,而且整個(gè)實(shí)驗(yàn)周期僅需6h左右,操作簡(jiǎn)便,可用于大量標(biāo)本的檢測(cè)。盡管與熒光素染色凝膠電泳相比較,PCR-ELISA檢測(cè)結(jié)果的特異性,靈敏性和準(zhǔn)確性有顯著的提高,但是ELISA試劑盒基本上是一個(gè)開放性的反應(yīng)系統(tǒng),特別是在洗滌大鼠ELISA試劑盒反應(yīng)板時(shí),很容易造成污染,從而引起假陽(yáng)性。因此,在PCR-ELISA整個(gè)實(shí)驗(yàn)過(guò)程中,必須進(jìn)行嚴(yán)格的無(wú)菌操作,同時(shí),PCR-ELISA對(duì)PCR產(chǎn)物和探針的雜交條件要求嚴(yán)格。

TEL:021-61210612

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