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塔卡里伯病毒PCR檢測試劑盒廠家

產(chǎn)品簡介

塔卡里伯病毒PCR檢測試劑盒廠家
上海聯(lián)祖生物相關(guān)產(chǎn)品:
anti-DNase B檢測試劑盒 高純度——根據(jù)SDS-PAGE分析純度為85%-95%方便——使用直接從冰箱中取出的雞蛋;無需等待其預熱

更新時間:2021-03-13
訪問次數(shù):573
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注意事項:1.基礎(chǔ)程序;2.擴增溫度和延伸溫度;3.反應(yīng)時間;4.循環(huán)次數(shù);5.PCR 反應(yīng)液的配制;6.PCR技術(shù)的基本原理;7.PCR的反應(yīng)動力學;8.PCR擴增產(chǎn)物;9.PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。

 產(chǎn)品名稱

 塔卡里伯病毒PCR檢測試劑盒廠家

 英文名稱

 Tacaribe Virus(TCRV)RTPCR

 貨號

 LZP7362

組成及試劑配制:
1、酶標板:一塊(96孔)
2、 標準品(凍干品): 2瓶,請臨用前15分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時反復顛倒/搓動以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進行倍比稀釋),分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標準品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標準品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。
3、 樣品稀釋液:1×20ml。
4、 檢測稀釋液A:1×10ml。
5、 檢測稀釋液B:1×10ml。
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實驗過程:
一、試劑準備
1. DNA模板
2.對應(yīng)目的基因的特異引物(在PCR反應(yīng)中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計的引物??梢允荄NA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計。因此,擴增不同的基因需要設(shè)計不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步驟
1.在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer             5μl
dNTP mixl                 4μl
引物1(10pM)               2μl
引物2(10PM)              2μl
Taq酶(2U/μl)            1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl)    1 μl
ddH2O至               50 μl
PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2.調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
3.結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4.PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
三、注意事項
1.PCR反應(yīng)應(yīng)該在一個沒有DNA污染的干凈環(huán)境中進行設(shè)立一個的PCR實驗室。
2.純化模板所選用的方法對污染的風險有極大影響。一般而言,只要能夠得到可靠的結(jié)果,純化的方法越簡單越好。
3.所有試劑都應(yīng)該沒有核酸和核酸酶的污染。操作過程中均應(yīng)戴手套。
4.PCR試劑配制應(yīng)使用zui高質(zhì)量的新鮮雙蒸水,采用0.22μm濾膜過濾除菌或高壓滅菌。
5.試劑都應(yīng)該以大體積配制,試驗一下是否滿意,然后分裝成僅夠一次使用的量儲存,從而確保實驗與實驗之間的連續(xù)性。
6.試劑或樣品準備過程中都要使用一次性滅菌的塑料瓶和管子,玻璃器皿應(yīng)洗滌干凈并高壓滅菌。
7.PCR的樣品應(yīng)在冰浴上化開,并且要充分混勻。
Rhuscholide A間苯 99%2,4-二甲基吡啶 97%

Riboflavine對苯 98%2,5-二甲基吡啶 98%

Roflumilast鄰甲苯 98%硫酸鋁 99.99% metals basis

Rotene鄰苯甲酸 98%對溴苯甲 99%

Rubroside G對苯甲酸 98%3-溴酮酸乙酯 90%

Rubroside H4-苯胺 98%酮酸乙酯 99%

Salpriolactone4-苯甲 97%酮酸 96%

Sarcosine2-苯酚 98%對羥基苯甲酸丁酯 99%

Sarmentosin4-苯酚 98%對羥基苯甲酸丁酯 CP,98%

Senkyulide A對甲苯 98%對羥基苯甲酸丁酯 分析標準品,>99.5%(GC)

Senkyulide H3-苯酸甲酯 98%尼泊金乙酯 CP,99.0%  

Senkyulide I2-甲氧基酚噻 98%尼泊金乙酯 AR,99%

Shikimic acidN-基-4-哌啶酮 98%尼泊金乙酯 分析標準品,99.7%

Shikofuran A3-苯酸 GR,99%對羥基苯甲酸 99%

Sinigrin2-三氟甲基噻噸酮 98%4-羥基苯甲 98%

Solanesol2,3,5-三苯甲酸 98%4-羥基苯 分析標準品

Amberlite IR-120陽離子交換樹脂(鈉型)PRAS40 Antibodyphospho-ADRB2(Ser346)  磷酸化腎上腺素能受體β2抗體

乙酸戊酯(標準品)Phospho-PRK1 (Thr774)/PRK2 (Thr816) Antibodyphospho-ADRB2 (Ser261)  磷酸化腎上腺素能受體β2抗體

烯酸(HPAA)(標準品)PRK2 AntibodyPhospho-Ack1(Tyr859/860)  磷酸化Ack1抗體

苯乙酮(標準品)HP1β AntibodyPhospho-Ack1(Tyr326)  磷酸化Ack1抗體

苯甲(標準品)Pan-Calcineurin A AntibodyPhospho-Ack1(Tyr284)  磷酸化Ack1抗體

氯烯(標準品)PAK2 (C17A10) Rabbit mAbphospho-Acinus(Ser1180)  磷酸化腺泡Acinus蛋白抗體

乙酰苯胺(標準品)PAK2 (C17A10) Rabbit mAbPhospho-Acetyl CoA Carboxylase(Ser79)  磷酸化乙酰輔酶A羧化酶抗體

鄰甲氧基苯胺(標準品)HP1α AntibodyPhospho-A Raf(Tyr301/302)  磷酸化A-Raf抗體

鄰氨基苯酚(標準品)eIF4G (C65H5) Rabbit mAbPhospho-A Raf(Ser299)  磷酸化A-Raf抗體

2-氨基-4-硝苯(標準品)HP1γ Antibodyphospho-A Raf(Ser214)  磷酸化A-Raf抗體
塔卡里伯病毒PCR檢測試劑盒廠家Sarcosine ethyl ester hydrochloride,99%通用試劑 5G

Riboflavin 5′-phosphate sodium salt h...通用試劑 5G

Sarcosine methyl ester hydrochloride,...通用試劑 5G

Thymol Blue sodium salt通用試劑 1G

Melatonin,≥98%通用試劑 250MG

L-Leucil,96%通用試劑 5G

Boc-Arg(2)-OH,≥98.5%通用試劑 5G

Fmoc-D-Asn-OH,≥98.0%通用試劑 1G

Fmoc-D-Met-OH通用試劑 5G

Z-Gly-Pro-Arg PNA acetate salt通用試劑 5MG

O-Acetyl-L-serine hydrochloride通用試劑 100MG

2-Hydroxyethyl)-β-Cyclodextrin,≥99.0%通用試劑 25G

Methyl-β-cyclodextrin通用試劑 1G

1-Amibenzotriazole通用試劑 100MG

D-(+)-Galacturonic acid mohydrate,≥...通用試劑 1G
檢測步驟:
一、 試劑的準備
從試劑盒中取出熒光PCR反應(yīng)液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX),冰上融化并振蕩混勻后,10000rpm離心10s。
設(shè)所需要的PCR反應(yīng)管管數(shù)為N(N=樣本數(shù)+1管陰性對照+1管陽性對照),每個測試反應(yīng)體系配制如下表:
試劑 每個反應(yīng)加入的量 N個反應(yīng)加入的量
熒光PCR反應(yīng)液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1 µL
總量 15 µL N×15µL
1) 計算好各試劑的使用量,加入一適當體積潔凈離心管中,充分混勻,10000rpm離心10s,向設(shè)定的N個PCR反應(yīng)管中分別加入15μL熒光PCR反應(yīng)液,向每管中加入處理后樣品或陰性對照(NTC)和陽性對照(BC-PTC)5μL,10000rpm瞬時離心10秒。
7.2 qPCR反應(yīng)條件
將各反應(yīng)管放入定量PCR儀器的反應(yīng)槽內(nèi)。
推薦循環(huán)條件:
1循環(huán) 50℃ for 2 min
預變性 1循環(huán) 95℃ for 10 min
PCR擴增 40循環(huán) 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
60℃延伸時收集熒光信號。報告基團:設(shè)置為FAM。淬滅基團:NONE,請勿選擇ROX參比熒光。

 

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