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鼻疽伯克霍爾德菌(BM)核酸試劑盒廠家

產(chǎn)品簡介

素標(biāo)記兔抗、大、整合素樣金屬蛋白酶與凝血酶1型-7(N端)IgG100 ul

鵝維生素D3(VD3)ELISA試劑盒ADAM-TS12/FITC 熒光素標(biāo)記整合素樣金屬蛋白酶與凝血酶1型-12IgG100 ul

鵝降鈣素(CT)ELISA試劑盒ACV-A/FITC 熒光素標(biāo)記

更新時(shí)間:2021-03-13
訪問次數(shù):703
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注意事項(xiàng):1.基礎(chǔ)程序;2.?dāng)U增溫度和延伸溫度;3.反應(yīng)時(shí)間;4.循環(huán)次數(shù);5.PCR 反應(yīng)液的配制;6.PCR技術(shù)的基本原理;7.PCR的反應(yīng)動(dòng)力學(xué);8.PCR擴(kuò)增產(chǎn)物;9.PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。

 產(chǎn)品名稱

 鼻疽伯克霍爾德菌(BM)核酸試劑盒廠家

 規(guī)格

 48T

 貨號(hào)

 LZP8014

組成及試劑配制:
1、酶標(biāo)板:一塊(96孔)
2、 標(biāo)準(zhǔn)品(凍干品): 2瓶,請臨用前15分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時(shí)反復(fù)顛倒/搓動(dòng)以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進(jìn)行倍比稀釋),分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標(biāo)準(zhǔn)品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標(biāo)準(zhǔn)品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。
3、 樣品稀釋液:1×20ml。
4、 檢測稀釋液A:1×10ml。
5、 檢測稀釋液B:1×10ml。
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實(shí)驗(yàn)過程:
一、試劑準(zhǔn)備
1. DNA模板
2.對應(yīng)目的基因的特異引物(在PCR反應(yīng)中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計(jì)的引物??梢允荄NA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計(jì)。因此,擴(kuò)增不同的基因需要設(shè)計(jì)不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步驟
1.在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer             5μl
dNTP mixl                 4μl
引物1(10pM)               2μl
引物2(10PM)              2μl
Taq酶(2U/μl)            1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl)    1 μl
ddH2O至               50 μl
PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2.調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
3.結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4.PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
三、注意事項(xiàng)
1.PCR反應(yīng)應(yīng)該在一個(gè)沒有DNA污染的干凈環(huán)境中進(jìn)行設(shè)立一個(gè)的PCR實(shí)驗(yàn)室。
2.純化模板所選用的方法對污染的風(fēng)險(xiǎn)有極大影響。一般而言,只要能夠得到可靠的結(jié)果,純化的方法越簡單越好。
3.所有試劑都應(yīng)該沒有核酸和核酸酶的污染。操作過程中均應(yīng)戴手套。
4.PCR試劑配制應(yīng)使用zui高質(zhì)量的新鮮雙蒸水,采用0.22μm濾膜過濾除菌或高壓滅菌。
5.試劑都應(yīng)該以大體積配制,試驗(yàn)一下是否滿意,然后分裝成僅夠一次使用的量儲(chǔ)存,從而確保實(shí)驗(yàn)與實(shí)驗(yàn)之間的連續(xù)性。
6.試劑或樣品準(zhǔn)備過程中都要使用一次性滅菌的塑料瓶和管子,玻璃器皿應(yīng)洗滌干凈并高壓滅菌。
7.PCR的樣品應(yīng)在冰浴上化開,并且要充分混勻。
卡格列凈半水;坎格列凈半水Phospho-cdc2 (Tyr15) (10A11) Rabbit mAb5-噻吩-2-甲

5'-二酸胞苷三鈉鹽Phospho-cdc2 (Tyr15) (10A11) Rabbit mAb5-羧基熒光素

2,二氫并呋喃 EOMES Antibody5-溴并噻唑

dT亞酰單體Phospho-MAP2 (Ser136) Antibody5-溴-2-羧基噻吩

Bz-2'-脫氧胞苷亞酰單體MAP2 Antibody6--吲唑

匹多莫德NY-ESO-1 (D1Q2U) Rabbit mAb6-硝基吲唑

匹多莫德(標(biāo)準(zhǔn)品)Keratin 17 (D73C7) Rabbit mAb7-硝基吲哚

硫酸羥基喹Keratin 17 (D73C7) Rabbit mAbBoc-D-酪氨酸

酰唑Phospho-MAP2 (Thr1620/1623) AntibodyD-2-氨基己二酸

O-6-芐基鳥嘌呤,MGMT 的抑制劑Pan-Keratin (C11) Mouse mAb1,雙(二基膦)丁烷

竹紅菌甲素(標(biāo)準(zhǔn)品)Pan-Keratin (C11) Mouse mAbD-甘露糖

氟米龍Keratin 8/18 (C51) Mouse mAbD-賴氨酸鹽酸鹽

氟米龍(標(biāo)準(zhǔn)品)Keratin 8/18 (C51) Mouse mAb1-(二甲氨基基)-基碳二亞鹽酸鹽

阿西美辛TRIM33 (D7U4F) Rabbit mAb (PE Conjuga)Fmoc-O-叔丁基-L-蘇氨酸

阿西美辛(標(biāo)準(zhǔn)品)Phospho-PDGF Receptor α (Tyr1018) AntibodyL-2-氨基丁酰鹽酸鹽

β-巰基,半胱 Phospho-PDGF Receptor α (Tyr1018) Antibody鳥氨酸

鹽酸Keratin 18 (DC10) Mouse mAbL-焦谷氨酸酯

鹽酸(標(biāo)準(zhǔn)品)Keratin 18 (DC10) Mouse mAbL-亮氨

胃動(dòng)素(MTL)ELISA試劑盒ADAM10/MADM/CD156c/FITC  熒光素標(biāo)記去整合素樣金屬蛋白酶10IgG100 ul

白蛋白(Albumin)ELISA試劑盒ADAM-TS7/FITC  熒光素標(biāo)記整合素樣金屬蛋白酶與凝血酶1型-7IgG100 ul

5羥色(5-HT)ELISA試劑盒14-3-3 family proin/FITC  熒光素標(biāo)記植物14-3-3蛋白IgG20 ul

ELISA試劑盒ADAM-TS7/FITC  熒光素標(biāo)記兔抗、大、整合素樣金屬蛋白酶與凝血酶1型-7(N端)IgG100 ul

鵝維生素D3(VD3)ELISA試劑盒ADAM-TS12/FITC  熒光素標(biāo)記整合素樣金屬蛋白酶與凝血酶1型-12IgG100 ul

鵝降鈣素(CT)ELISA試劑盒ACV-A/FITC  熒光素標(biāo)記活化素AIgG100 ul

鵝骨鈣素/骨谷氨酸蛋白(OT/BGP)ELISA試劑盒Adducin proin/FITC  熒光素標(biāo)記內(nèi)收蛋白IgG20 ul

鵝鈣結(jié)合蛋白(CR)ELISA試劑盒Adenosine A2A-R/FITC  熒光素標(biāo)記腺苷A2A受體IgG100 ul

ELISA試劑盒ADFP/ADRP/adipophilin/FITC  熒光素標(biāo)記脂肪組織分化相關(guān)蛋白IgG100 ul
鼻疽伯克霍爾德菌(BM)核酸試劑盒廠家磷酸化Fas相關(guān)死亡結(jié)構(gòu)域蛋白抗體Arjunic acid中文名:別名:分子式:C30H48O5

冷休克蛋白DBPA抗體Myriceric acid B中文名:別名:分子式:C39H54O7

脫帽酶1A抗體3-Epikatonic acid中文名:別名:分子式:C30H48O3

清道夫脫帽酶/熱休克蛋白1抗體1-rbetulonic acid中文名:別名:1-Decarboxy-3-oxo-ceathic acid分子式:C29H44O3

干擾素調(diào)節(jié)因子4結(jié)合蛋白抗體Amooracetal中文名:別名:分子式:C32H52O5
檢測步驟:
一、 試劑的準(zhǔn)備
從試劑盒中取出熒光PCR反應(yīng)液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX),冰上融化并振蕩混勻后,10000rpm離心10s。
設(shè)所需要的PCR反應(yīng)管管數(shù)為N(N=樣本數(shù)+1管陰性對照+1管陽性對照),每個(gè)測試反應(yīng)體系配制如下表:
試劑 每個(gè)反應(yīng)加入的量 N個(gè)反應(yīng)加入的量
熒光PCR反應(yīng)液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1 µL
總量 15 µL N×15µL
1) 計(jì)算好各試劑的使用量,加入一適當(dāng)體積潔凈離心管中,充分混勻,10000rpm離心10s,向設(shè)定的N個(gè)PCR反應(yīng)管中分別加入15μL熒光PCR反應(yīng)液,向每管中加入處理后樣品或陰性對照(NTC)和陽性對照(BC-PTC)5μL,10000rpm瞬時(shí)離心10秒。
7.2 qPCR反應(yīng)條件
將各反應(yīng)管放入定量PCR儀器的反應(yīng)槽內(nèi)。
推薦循環(huán)條件:
1循環(huán) 50℃ for 2 min
預(yù)變性 1循環(huán) 95℃ for 10 min
PCR擴(kuò)增 40循環(huán) 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
60℃延伸時(shí)收集熒光信號(hào)。報(bào)告基團(tuán):設(shè)置為FAM。淬滅基團(tuán):NONE,請勿選擇ROX參比熒光。

 

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TEL:021-61210612

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